Cato Brede Stavanger Universitetssykehus og Universitetet i Stavanger Email: cato.brede@uis.no
Salting-out assisted liquid-liquid extraction (SALLE) har etablert seg som en effektiv og kostnadsbesparende metode for prøveopparbeidelse innen bioanalyse med LC-MS/MS. Dette foredraget gir en oversikt over SALLE-teknikkens prinsipper og fordeler, og med særlig fokus på praktisk anvendelse.
SALLE utnytter utsaltingseffekten til å danne faseskille etter tilsetting av et vannløselig løsemiddel til en biologisk prøve. Uten salt gir dette vanligvis kun proteinfelling. Med salt får man faseskille og ekstraksjon tilsvarende LLE, men uten behov for overføring og inndamping av løsemidler. sqdzDet vannløselige løsemiddelet er kompatibelt med RP-LC-MS.
I et nytt patentet (NO348856B1) demonstrerer vi hvordan SALLE kan kombineres med derivatisering, slik at man får ekstraksjon og derivatisering i den samme mikroplaten som settes inn i LC-MS/MS instrumentet. Her spares det både plastikk og tid i prøveopparbeidelsen. Med reagenset PTAD får vi en fantastisk analyse av vitamin D-metabolitter i serum og fiskeblod, uten behov for overføring og inndamping av løsemidler. I en annen analyse kan vi omdanne ketosteroider til hydrazoner for å øke sensitiviteten i kliniske hormon-analyser.